
检测核酸纯度方法
紫外吸收检测DNA浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的: 了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理,掌握测定方法。
原理: 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg\\\/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg\\\/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值(OD260\\\/OD280),估计核酸的纯度。
纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。
若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。
270nm存在高吸收表明有酚的干扰。
紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg\\\/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法。
试剂与仪器: 提取的质粒DNA,紫外分光光度仪。
操作步骤:1) 分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零。
2) 取质粒DNA样品2μl,用水稀释100倍,转入分光光度计的石英比色杯中。
3) 在260nm和280nm分别读出样品光密度值。
如果样品浓度单位为μg\\\/μl,则样品DNA浓度为OD 值的10倍,即如OD260<\\\/SUB>=0.1,则样品浓度即为1μg\\\/μl。
4) 若OD260<\\\/SUB>\\\/OD280<\\\/SUB>大于1.8,说明仍有RNA,可以考虑用RNA酶处理样品,若小于1.8,说明样品中含有蛋白质或酚,应再用酚\\\/氯仿抽提,以乙醇沉淀纯化DNA。
核酸种类的检测方法
可以的,做完的核酸检测报告别人可以帮忙领的,你要领取的凭证给他就可以。
核酸检测前注意事项
不能,潜伏期是14天
一份核酸阳性报告至少要12小时,如何提高检测核酸的效率
你好,目前(2050.6.11)只要不是高风险区域的就不用做,但需要出示健康码并测量体温。
希望回答能够帮助到你。



