急求：离子交换柱层析分离氨基酸的讲义
目的学习用阳离子交换树脂柱分离氦基酸作和基本原理。
二、原理各种氨基子的结构不同，在同一PH时与离子交换树脂的亲和力有差异，因此可依亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来，达到分离的效果。
三、器材1、20cmX 1cm层析管 2、试管3、吸管． 4、恒压洗脱瓶5、部分收集器 6、搪磁杯7、电炉 8、分光光度计四、试剂和材料1、．苯乙烯磺酸钠型树脂（强酸 lx 8，l00一200目，可用上海华东化工学院产品）2 、2 mol／L盐酸溶液3、2mol／L氢氧化钠溶液4、标准氨基酸溶液 天冬氨酸、赖氨酸和组氨酸均配制成 2 mg／mL的0.1M盐酸溶液。
5、混合氢基酸溶液将上述天冬氨酸、赖氨酸和组氨酸溶液按1：2．5：10的比例混合。
6、柠檬酸－氢氧化钠一盐酸冲液（pH5.8），钠离子浓度0 .45M）取柠檬酸（C6O7H8.H20 ）14.25g、氢氧化钠9.30g和 浓盐酸 5．25 mL溶于少量水后，定容至 500 mL，冰箱保存。
7、显色剂 2 g水合茚三酮溶于 75mL乙二醇单甲醚中．加水至 100 mL。
8、50%乙醇水溶液五、操作1、层析柱的准备：将强酸型阳离子交换树脂用氢氧化钠处理成Na+型后洗至中性（处理方法见第三篇实验十二）．搅拌一小时后装成一个直径1cm．高 16～18 cm的层析柱。
2、氨基酸的洗脱：用P H5.8的柠檬酸缓冲液流洗平衡交换住（装置如图）。
调节流速为 0.5 mL／min，流出液达床体积的4倍时即可上样。
由柱上端仔细加人氨基酸混合液0．25—0．5 mL，同时开始收集流出液。
当样品液弯月面靠近树脂顶端时，即刻加入0.5 mL拧檬酸缓冲液冲洗加样品处。
待缓冲液弯月面靠近树脂顶端时。
再加入0．5 mL缓冲液。
如此重复两次，然后用滴管小心注入柠檬酸缓冲液（切勿搅动床面），并将柱与洗脱瓶和部分收集器相连。
开始用试管收集洗脱液，每管收集lmL．共收集60一80管。
3、氨基酸的鉴定：向各管收集液中加lmL水合茚三酮显色剂并混匀，在沸水浴中淮确加热15分钟后冷却至室温．再加15 mL的50％乙醇液。
放置10分钟。
以收集液第2管为空白，测定A570nm波长的光吸收值。
以光吸收值为纵坐标，以柱洗脱体积为横坐标绘制洗脱曲线。
以已知3种氨基酸的纯溶液为样品，按上述方法和条件分别操作，将得到的洗脱曲线与混合氨基酸的洗脱曲线对照．可确定3个峰的大致位置及各蜂为何种氨基酸。
求离子交换柱层析法和拥有分子筛作用的（叫什么忘了）的两个实验报告或操作详细说明
离子交换柱层析法的核心在于不同的蛋白质的等电点不同所以说，利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质其实就是利用不同蛋白质不同的等电点来分离。
比如目的蛋白等电点是5，那么在环境pH为8.0的情况下，目的蛋白可以结合阴离子交换层析，而杂蛋白可能不能结合或者结合能力比目的蛋白弱。
通过不同的盐浓度的洗脱让结合能力不同的蛋白在不同的组分被洗脱出来，最终完成对目的蛋白和杂蛋白的分离。
离子交换柱的工作原理
柱的工作原理：采用离子交换方法，可以把水中呈离子态的阳、阴离子去除。
以氯化钠（NaCl）水中无机盐类，水质除盐的基本反应可以用下列方程式表达： 1、阳离子交换树脂：R—H+Na+→R-Na+H+ 2、阴离子交换树脂：R—OH+CL-→R-CL+OH+ 阳、阴离子交换树脂总的反应式即可写成： RH+ROH+NaCL—RNa+RCL+H2O 由此可看出，水中的Nacl已分别被树脂上的H+和OH-所取代，而反应生成物只有H2O，故达到了去除水中盐的作用。
离子交换柱（ion exchange column）是用来进行离子交换反应的柱状压力容器。
充填有离子交换树脂的细长管柱。
可由玻璃、不锈钢、有机玻璃等不被所用的流动相腐蚀的材料制成。
离子交换柱（混床）的分类：混床按再生方式分可分为体内再生混床、体外再生混床、阴树脂外移再生混床三种。
离子交换柱的分类：混床按再生方式分可分为体内再生混床、体外再生混床、阴树脂外移再生混床三种。
1、体外再生混床适合小流量、对环保有严格要求的企业。
但由于体外再生式混床配套设备多，操作复杂，现在已很少使用。
2、体内再生混床和阴树脂外移再生混床适合大流量，有专门的水处理操作人员及废水处理的场合。
体内再生混床在运行及整个再生过程均在混床内进行，再生时树脂不移出设备以外，且阳、阴树脂同时再生，因此所需附属设备少，操作简便。
3、阴树脂外移再生混床：阴树脂外移再生式混合床及其配套的阴树脂再生柱基本构造与小型逆流再生固定床大致相同，阴树脂再生柱厚度较混合床小，所需的膨胀高度为树脂层高度的50%～60%，故再生柱可较低，但一般为统一起见做成与混合床相同。
在蛋白质纯化中，除了离子交换层析之外，还有哪些常用的柱层析方法纯化蛋白质
在蛋白纯化中，除了离子交换层析之外，还有哪些常用的柱层析方法纯化蛋白质离子交换层析是根据蛋白质所带电荷的差异进行分离纯化的一种方法.蛋白质的带电性是由蛋白质多肽中带电氨基酸决定的.由于蛋白质中氨基酸的电性又取决于介质中的pH,所以蛋白质的带电性也就依赖于介质的pH.当pH较低时,负电基团被中和,而正电基团就很多; 在pH较高时,蛋白质的电性与低pH时相反.当蛋白质所处的pH,使蛋白质的正负电荷相等,此时的pH称为等电点.离子交换层析所用的交换剂是经酯化、氧化等化学反应引入阳性或阴性离子基团制成的,可与带相反电荷的蛋白质进行交换吸附.带有阳离子基团的交换剂可置换吸附带负电荷的物质,称为阴离子交换剂,如DEAE-纤维素树脂;反之称为阳离子交换剂,如CM-纤维素树脂.不同的蛋白质有不同的等电点,在一定的条件下解离后所带的电荷种类和电荷量都不同,因而可与不同的离子交换剂以不同的亲和力相互交换吸附.当缓冲液中的离子基团与结合在离子交换剂上的蛋白质相竞争时,亲和力小的蛋白质分子首先被解吸附而洗脱,而亲和力大的蛋白质则后被解吸附和洗脱.因此,可通过增加缓冲液的离子强度和\\\/或改变酸碱度,便可改变蛋白质的吸附状况,使不同亲和力的蛋白质得以分离.
离子交换柱层析原理是什么
离子的半径电荷等差异会影响它在离子交换柱上的移动速度，进而实现层析。
离子交换柱层析能分离纯化蔗糖酶的主要依据是什么?
你用的是什么离子交换柱，强酸型阳离子交换柱，还是弱酸型阳离子交换柱，还是强碱性阴离子交换柱，还是弱碱性阴离子交换柱，以及你的蔗糖酶的等电点，和你缓冲液的等电点，有这些性质我才能准确的告诉你原因
离子交换柱层析如果柱面有洞会怎样
吸附分离效果不好，考虑湿法装柱
