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蚕豆核型分析实验心得体会

时间:2018-06-28 00:53

急求几篇关于蚕豆核型分析参考文献。

PS处理方法。

谢谢

(1)根尖细胞进行有丝分裂,用秋水仙素处理细胞时会抑制纺锤体的形成,从而使分开的染色体不能移向两极形成两个子细胞,使细胞染色体数目加倍.(2)由于DNA分子的半保留复制,Ⅰ中,在根尖细胞进行第一次分裂时,以没有标记的DNA母链为模板,利用3H的胸腺嘧啶核苷作为原料,因此复制形成的每个DNA分子中有1条链带有放射性,并且每条染色体上两条染色单体都带有放射性.Ⅱ中,开始亲代DNA分子双链都被3H标记,而后来一个细胞具有24条染色体,并且每条染色体上只有一条染色单体又放射性,说明已完成一次有丝分裂且染色体数目加倍,该细胞可能处于第二次有丝分裂的前期或中期,因此细胞染色体已复制2次,并且含有4个染色体组.(3)该实验表明DNA分子的复制方式是半保留复制.故答案为:(1)有丝分裂 抑制纺锤体的形成(2)2 1 2 4 (3)半保留复制

蚕豆根尖染色体核型分析

(1)根尖细胞进行有丝分裂,用秋水仙素处理细胞时会抑制纺锤体的形成,从而使分开的染色体不能移向两极形成两个子细胞,使细胞染色体数目加倍.(2)由于DNA分子的半保留复制,Ⅰ中,在根尖细胞进行第一次分裂时,以没有标记的DNA母链为模板,利用3H的胸腺嘧啶核苷作为原料,因此复制形成的每个DNA分子中有1条链带有放射性,并且每条染色体上两条染色单体都带有放射性.Ⅱ中,开始亲代DNA分子双链都被3H标记,而后来一个细胞具有24条染色体,并且每条染色体上只有一条染色单体又放射性,说明已完成一次有丝分裂且染色体数目加倍,该细胞可能处于第二次有丝分裂的前期或中期,因此细胞染色体已复制2次,并且含有4个染色体组.(3)该实验表明DNA分子的复制方式是半保留复制.故答案为:(1)有丝分裂 抑制纺锤体的形成(2)2 1 2 4 (3)半保留复制

蚕豆染色体核型公式

蚕豆属于大型染色体,6对染色体平均长度为11.33μm,核型分类为2A,核型公式为2n=2x=12=4m+4Sm(2SAT)+2ST+2T

蚕豆染色体核型公式

蚕豆属于大型染色体,6对染色体平均长度为11.33μm,核型分类为2A,核型公式为2n=2x=12=4m+4Sm(2SAT)+2ST+2T

如何进行人体染色体核型分析

一般人是抽取外周血,经秋水仙素处理后,制片染色就可以在显微镜下观察到染色体,进行拍照分析。

孕妇的话根据需要抽取脐带血,羊水。

需要具体步骤吗

如何进行人体染色体核型分析

一般人是抽取外周血,经秋水仙素处理后,制片染色就可以在显微镜下观察到染色体,进行拍照分析。

孕妇的话根据需要抽取脐带血,羊水。

需要具体步骤吗

染色体相对长度的求法

染色体核型分析主要包括染色体长度、染色体臂比、着丝点位置、次缢痕等。

染色体的长度差异有两种,一种同种、属间染色体组间相对应的染色体的绝对长度差异,一种是同一套染色体组内不同染色体的相对长度差异。

绝对长度通常在放大的照片或图象上以微米(μm)进行测量,然后按下式换算:染色体绝对长度 = 放大的染色体长度(μm)× 1000 \\\/ 放大倍数绝对长度不大稳定,这是因为预处理条件和染色体的缩短程度难以完全相同,即使同一个体的不同细胞的染色体,缩短程度也常常不同。

因此,绝对长度只有在染色体大小差异明显的种或属间的比较才有价值。

而对于染色体大小差异不明显的材料间的比较,常常以相对长度作为量度染色体的标准。

染色体相对长度是以百分比表示,通常采用Levan(1964)的公式计算:染色体相对长度 =(染色体长度\\\/染色体组总长度)× 100%由于相对长度排除了因技术原因引起的染色体短缩程度不同所产生的差异,因此,相对长度值是一个较稳定的可比较的数值。

而绝对长度则往往只记录变异范围。

不同属、种,以及不同变种之间,因染色体变异,会引起同源染色体长臂与短臂不一样,这通常用染色体臂比来进行比较。

通用公式如下:染色体臂比 = 长臂(L)\\\/短臂(S)由于染色体长臂和短臂不一,就表现出着丝点位置不同。

此外,在核型分析中,次缢痕或核仁组成区(NOR)和随体(SAT)的数目、分布和大小的差异,常常成为区分某些近缘种或属的主要特征,因此,它们识别与判断极为重要。

例如,葱、洋葱和大蒜的染色体数目和基本形态都相近似,但是,其随体的数目、大小和位置明显不同,而易于区分。

每一物种的染色体组型分析,为什么要测量多个分裂相

X小体检测及染色体组型分析(3学时)实验目的(一):X小体检测1掌握X小体玻片标片制作方法,2绘制X小体形态特征及所在部位。

3鉴定个体的性别,为进一步研究人类染色体畸变与疾病的关系提供基础方法、为遗4病临床诊断提供参考。

实验目的(二):染色体组型分析1掌握染色体组型分析的各种数据指标2学习染色体组型分析的基本方法实验原理:(一)1949年Barr和Bertran在研究猫的间期神经细胞时,发现雌猫体细胞核膜边缘有一个可被碱性染料染色的小体而雄猫没有。

后来发现人类正常女性口腔上皮、阴道上皮、皮肤、羊水等的细胞中都有一个这样的小体,继而有人进一步发现所有哺乳动物(mammal;mammalian)雌体细胞中都有同样的一个小体。

一般认为这种小体是两个X染色体中的一个在间期发生异固缩形成的,故而将其称为X小体,X染色质,又称为Barr小体。

Barr小体出现在哺乳动物(mammal;mammalian)雌性个体细胞的细胞核膜边缘,这主要是因为这条染色体处在失活状态所致,Morishima等利用放射性标记的方法证实了失活状态的性染色体与其他异染色质(heterochromatin)一样,在DNA复制时总落后于其他常染色质,且大多出现在核膜边缘。

性染色质的数目是X染色体数减1。

故可以根据X小体的有无、数目来鉴定胎儿的性别和性别畸形。

(二)定义:染色体组型又称核型,是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群(亚种、种、属等)的体细胞内的整套染色体,按它们相对恒定的特征排列起来的图像。

核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来,再按长短、形态等特征排列起来的图像。

染色组通常是指生物体细胞染色体所有可测定的表型特征的总称,包括染色体的总数,染色体组的数目,组内染色体基数、每条染色体大小、形态等。

它是物种特有的染色体信息之一,具有很高的稳定性和再现性。

染色组型分析是对染色体进行分组,对核型的各种特征进行定量和定性的描述,如对染色体长度、着丝点位置、臂比和随体有无等。

为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据 。

实验材料:(一)口腔粘膜(男女)、发根细胞(女)。

(二)人染色体放大照片;或蚕豆或大麦等有丝分裂中期标本和显微摄影所得放大照片,要求染色体分散良好,无重叠或重叠很少,着丝粒、随体等形态清晰可辨。

实验器具和药品:(一)1.器具:普通显微镜、荧光显微镜、恒温水浴锅、载玻片、盖玻片、镊子、牙签、滤纸、纱布等。

2.药品:95%乙醇、乙醚、改良碱性品红、盐酸喹吖、Macllvaine氏缓冲液、石蜡。

(二)1.仪器用具:显微镜(附摄影装置)、冰箱、恒温水浴锅、135胶卷、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、解剖针、刀片及毫米尺、胶水、计算器、白纸。

2.药品试剂:无水酒精、70%酒精、冰乙酸、碱性品红、苯酚、甲醛、山梨醇、对二氯苯、1N盐酸、0.05%秋水仙碱。

实验步骤:(一)1.取材:受检查者用水漱口数次,尽可能除去细菌和食物残渣;用洁净的牙签从口腔两侧颊部刮取粘膜,第一次刮取物弃去,将第二次、第三次刮取物涂在干净的载玻片上。

2.固定:滴加固定液(95%乙醇:乙醚=1:1或直接用乙醇)固定20~30min,空气干燥。

3. 染色制片:滴加1~2滴改良品红于室温下染色10~20min(勿使干燥),加上盖片,垫上滤纸用手指轻轻加压即可。

4. 镜检:低倍镜下计数100个核膜完整,细胞不重叠,无核固缩的细胞;并在高倍或油镜下观察。

若使用女性发根细胞,需选用带有毛囊的头发(约2cm长),再加一滴染液后加上盖玻片,洒精灯上微热,静置5min,后盖一滤纸压片。

5. 结果: 油镜下可见X小体为一致密的浓染小体。

轮廓清晰,约1um,常附着于核膜边缘或靠边内侧,其形态有三角形、卵形、扁平形等。

正常女性间期细胞核中X小体比例约30%~50%,男性中则偶尔可见(2%),且不典型。

(二)1 计数,沿边缘剪下染色体,编号2 初步目测配对,分组3 测量长度,计算相对长度、着丝粒指数、 臂比,相同的染色体间配对4 将配对好的染色体排列并粘贴在纸上,每一组下面画一横线,在两端注明起止号,并在横线下的中部写明A-G组号,染色体从大到小编为1-22号,性染色体单独列为一组组型分析实验方法:1 染色体数目确定2 染色体形态特征:3 长度:绝对、相对4 相对长度=每条染色体的长度\\\/全套染色体长度5 臂比=长臂\\\/短臂6 着丝点指数=短臂\\\/(长+短臂)7 随体的有无分组排队原则:1 着丝粒类型相同,相对长度相近的分一组2 同一组的按染色体长短顺序配对排列3 各指数相同的染色体配为一对

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