食品微生物学检验 菌落总数测定报告怎么写
食品微生物学检验 菌落总数测定 1 范围 本标准规定了食品中菌落总数（Aerobic plate count）的测定方法。
本标准适用于食品中菌落总数的测定。
2 术语和定义 2.1 菌落总数 aerobic plate count 食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
3 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 3.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。
3.2 冰箱：2 ℃～5 ℃。
3.3 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。
3.4 天平：感量为0.1 g。
3.5 均质器。
3.6 振荡器。
3.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL。
3.9 无菌培养皿：直径90 mm。
3.10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
3.11 放大镜或\\\/和菌落计数器。
4 培养基和试剂 4.1 平板计数琼脂培养基：见附录A 中A.1。
4.2 磷酸盐缓冲液：见附录A 中A.2。
4.3 无菌生理盐水：见附录A 中A.3。
5 检验程序 菌落总数的检验程序见图1。
图 1 菌落总数的检验程序 6 操作步骤 6.1 样品的稀释 6.1.1 固体和半固体样品：称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r\\\/min～10000 r\\\/min 均质1 min～2 min，或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10 的样品匀液。
6.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。
6.1.3 用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。
6.1.4 按6.1.3 操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。
每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。
6.1.5 根据对样品污染状况的估计，选择2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释时，吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。
同时，分别吸取1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
6.1.6 及时将15 mL～20 mL 冷却至46 ℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
6.2 培养 6.2.1 待琼脂凝固后，将平板翻转，36 ℃±1 ℃培养48 h±2 h。
水产品30 ℃±1 ℃培养72 h±3 h。
6.2.2 如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4 mL），凝固后翻转平板，按6.2.1 条件进行培养。
6.3 菌落计数 可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。
菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units，CFU）表示。
6.3.1 选取菌落数在30 CFU～300 CFU 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。
低于30 CFU 的平板记录具体菌落数，大于300 CFU 的可记录为多不可计。
每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
6.3.2 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。
6.3.3 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌
我学的是食品科学与工程专业 就业时有什么方向是与之对口的么
太长了，发不下了，不是不是这个，是的话我度hi里发给你监督学作业1时间：学习完教一至第三章之后。
题目：勤政监督与廉政监督有何不同
应怎样完善我国的勤政监督
形式：小组讨论（个人事先准备与集体讨论相结合）。
要求每一位学员都提交讨论提纲，提纲包括以下内容：1、个人的讨论提纲。
2、小组讨论后形成的提纲。
教师根据每一位学员的讨论提纲以及小组讨论后形成的提纲给每一位学员评分。
要求能够谈出自己的观点，能够理论联系实际。
答：以下为小组讨论记录; n* b4 R% H: o' Z; F* \\\\: y1 |5 b) D老师：勤政监督与廉政监督是监督包含的两方面内容，我们先来讨论廉政监督。
1 V, m2 t0 I* k5 Z0 D G同学1：何为廉政监督是指监督机关对国家机关及其公职人员是否廉洁从政所实施的全面监督以及责任追究的活动。
何为廉政
廉政，顾名思义，是指清廉为官，廉洁从政。
一般来讲，任何政党，甚至团体，尽管其信仰、组织路线，意识形态各有不同，但是他们对其组织内部官员廉洁从政的要求大体相同。
亦即廉政是政党成员，政府官员忠于信仰，效力政府的道德底线，是德性、是品质、是从政为官的重要前提条件。
廉政监督是指监督机关对国家机关及其公职人员是否廉洁从政所实施的全面监督以及责任追究的活动。
同学2：廉政监督需要为官者以史为鉴，效仿前贤。
在我国历史上记载着许多清官廉吏，他们让百姓受惠，令世人敬仰，当然更应当是现今为官者的楷模。
例如，张伯行檄文禁馈送：清代乾隆年间，张伯行出任江苏巡抚，上任时他便公布了一份特别的官箴《禁止馈送檄》：“一丝一粒，我之名节；一厘一毫，民脂民膏。
宽一分，民受之不止一分；取一文，我为人不值一文。
谁云交际之常，廉耻实伤。
倘非不义之财，此物何来
”他正是这样惠政励已、廉洁自律，始终不违誓言，在历史上享有“江南第一清官”之誉。
5 X0 x; _- Q# ^1 u\\\/ a! h同学3：廉政监督需要文化。
廉政需要摒弃古今中外文化之糟粕，汲取古今中外文化之精华。
廉政需要廉政文化入耳、入眼、入心的陶冶和滋养。
廉政文化建设需要和社会文化、校园文化相融相和，永远并肩前行。
廉政需要为官者端正自身的名利观。
为官者要自醒、自重，通过长期艰苦的思想历练，坚持做到淡泊名利、鄙视官本位思想、耐得起寂寞、扛得住诱惑、经得起考验，努力做到宠辱不惊，心态平和。
为官者似乎应当有这种认识——值得尊敬的不是您的岗位，而是您在任何岗位上称职的工作。
; J. ` t. `% H\\\/ _- B同学4：一人犯罪株连九族的悲剧已经成为历史，但是一人升官，鸡犬升天的现象在我们国家的部分地方和单位仍然存在，尤其是在个别官员及亲族的内心深处仍然存在着极大的权力欲望和“乘车、借光”等思想，这些腐败或者是潜腐败的表象，也可能是某些官员不检点甚至走向堕落的初始根源，应当引起警惕，并深入做好防微杜渐的思想教育工作。
同学5：廉政监督需要为官者始终摆正官与民的关系。
几千年来，离我们早已远去的孔孟之道，留给后人那多为人为官的至理名言，回顾朝更代改的历史，真是令人叹服。
孟子曾针对人民与君王的关系时讲到：“民为重、社稷次之，君为轻”。
当官要摆正位置，为人民当的官不是父母官，你服务的百姓才是父母。
老百姓是水，水能载着你扬帆远行，水也可以让你翻船喂鱼。
同学2：廉政监督需要为官者努力践行群众观点和发扬民主作风。
同志讲过“越是困难的时候，越是要关心群众。
”“一个政党就怕听不到人民的声音，最可怕的是鸦雀无声。
”要懂得群众是真正的英雄；人民，只有人民才是创造历史的真正动力
为官者，来自于群众，就要永远尊重群众、爱戴群众，一旦忘了本，必将被人民所抛弃。
同学3：廉政监督需要党的监管机构设置科学合理。
廉政需要党的组织对党员领导干部实行监督的权威性和实效性。
中共中央从2003年建立的对各省、市、自治区主要党政领导干部的巡视制度；近年来，中央纪委对部分省、市“垂直”派驻纪委书记等举措，其目的就是为了强化党的组织对党的领导干部的监督职能。
作为领导干部本人要自觉接受监督，主动接受检查和提醒。
{老师：我们再来讨论勤政监督，以及如何完善我国的勤政监督
同学1：勤政是政党、政府对其官员使命感、责任意识的基本要求，当然也是中国共产党对于党员领导干部政治素质、思想品德的重要衡量指标，
求有关食品安全的知识（不少于100字）
食品安全知识宣传资料一、食品安全常识1、购买食物时，注意食品包装有无生产厂家、生产日期，是否过保质期，食品原料、营养成分是否标明，有无QS标识，不能购买三无产品。
2、打开食品包装，检查食品是否具有它应有的感官性状。
不能食用腐败变质、油脂酸败、霉变、生虫、污秽不洁、混有异物或者其他感官性状异常的食品，若蛋白质类食品发粘，渍脂类食品有嚎味，碳水化合物有发酵的气味或饮料有异常沉淀物等等均不能食用。
3、不到无证摊贩处购买盒饭或食物，减少食物中毒的隐患。
4、注意个人卫生，饭前便后洗手，自己的餐具洗净消毒，不用不洁容器盛装食品，不乱扔垃圾防止蚊蝇孳生。
5、少吃油炸、油煎食品二、什么是食品掺假、掺杂和伪造
（1）“掺假”是指食品中添加了廉价或没有营养价值的物品，或从食品中抽去了有营养的物质或替换进次等物质，从而降低了质量，如蜂蜜中加入转化糖，巧克力饼干加入了色素，全脂奶粉中抽掉脂肪等。
（2）“掺杂”即在食品中加入一些杂物，如腐竹中加入硅酸钠或硼砂；辣椒粉中加入了红砖木等。
（3）“伪造”是指包装标识或产品说明与内容物不符。
掺假、掺杂、伪造的食品，一般应由工商行政部门处理。
对影响营养卫生的，应由卫生行政部门依法进行处理。
三、禁止生产经营的食品包括哪些种类
禁止生产经营的食品包括下列类别：（1）腐败变质、油脂酸败、霉变、生虫、污秽不洁、混有异物或者其他感官性状异常，可能对人体健康有害的；（2）含有毒、有害物质或者被有毒、有害物质污染，可能对人体健康有害的；（3）含有致病性寄生虫、微生物，或者微生物毒素含量超过国家限定标准的；（4）未经卫生检验或者检验不合格的肉类及其制品；（5）病死、毒死或者死因不明的禽、畜、兽、水产动物等及其制品；（6）容器包装污秽不洁、严重破损或者运输工具不洁造成污染的；（7）掺假、掺杂、伪造、，影响营养、卫生的；（8）用非食品原料加工的，加入非食品用化学物质的或者将非食品当作食品的；（9）超过保质期限的；（10）为防病等特殊需要，国务院卫生行政部门或者省、自治区、直辖市人民政府专门规定禁止出售的；（11）含有未经过国务院卫生行政部门批准使用的添加剂的或者农药残留超过国家规定容许量的；（12）其他不符合食品卫生标准和卫生要求的。
四、如何判别伪劣食品
伪劣食品犹如过街老鼠，人人喊打。
但人们在日常购物时却难以识别。
《伪劣食品防范“七字法”》，以通俗易懂易记的方式引导消费者强化食品安全自我防范，以期使伪劣食品因缺乏市场而退出市场。
防范“七字法”：即防“艳、白、反、长、散、低、小”。
一防“艳”。
对颜色过分艳丽的食品要提防，如目前上市的草莓象蜡果一样又大又红又亮、咸菜梗亮黄诱人、瓶装的蕨菜鲜绿不褪色等，要留个心眼，是不是在添加色素上有问题
二防“白”。
凡是食品呈不正常不自然的白色，十有八九会有漂白剂、增白剂、面粉处理剂等化学品的危害。
三防“长”。
尽量少吃保质期过长的食品，3℃贮藏的包装熟肉禽类产品采用巴氏杀菌的，保质期一般为7—30天。
四防“反”。
就是防反自然生长的食物，如果食用过多可能对身体产生影响。
五防“小”。
要提防小作坊式加工企业的产品，这类企业的食品平均抽样合格率最低，触目惊心的食品安全事件往往在这些企业出现。
六防“低”。
“低”是指在价格上明显低于一般价格水平的食品，价格太低的食品大多有“猫腻”。
七防“散”。
散就是散装食品，有些集贸市场销售的散装豆制品、散装熟食、酱菜等可能来自地下加工厂。
五、食品储存应注意哪些问题?应建立出入库制度,做到先进先出;各类食品分类存放,标志明显,防止交叉污染;做到离墙离地,做到“四防”：防霉或防腐、防鼠、防虫、防蝇。
六、如何清洗果蔬上的残留农药
（1）水洗浸泡法（用清水洗干净后浸泡）：蔬菜污染的农药品种主要有机磷杀虫剂，有机磷杀虫剂难溶于水，此种方法仅能除去部分污染的农药，但水洗是清除蔬菜水果上其他污物和去除残留农药的基础方法。
主要用于叶类蔬菜。
一般先用水冲洗掉表面污物，否则等于将果蔬浸泡在稀释的农药里。
然后用清水浸泡，浸泡不少于10分钟，果蔬清洗剂可增加农药的溶出，所以浸泡时可以加入少量果蔬清洗剂，浸泡后要用流水冲洗2-3遍。
（2）清洗后碱水浸泡法：有机磷杀虫剂在碱性环境下分解迅速，所以此方法是有效地去除农药污染的措施，可用于各类蔬菜瓜果。
方法是先将表面污物冲洗干净，浸泡到碱水中（一般500m1水中加入碱面5g-10g）5-15分钟，然后用清水冲洗3-5遍。
（3）去皮法：外表不平或多细毛的蔬菜瓜果，较易沾染农药，所以削去外皮是一种较好的去除残留农药的方法。
（4）储存法：农药随着时间能缓慢分解为对人体无害的物质（空气中的氧与蔬菜中的酶对残留农药有一定的分解作用），所以对易于保存的瓜果蔬菜可以通过一定时间的存放，减少农药残留量。
一般应存放15天以上，同时建议不要立即食用新采摘的未削皮的瓜果。
（5）加热法：氨基甲酸酯类杀虫剂随着温度升高，分解加快，所以对一些其他方法难以处理的蔬菜瓜果可通过加热去除部分农药。
此法常用于芹菜、菠菜、小白菜、圆白菜、青椒、菜花、豆角等，先用清水将表面污染物洗净，放入沸水中2-5分钟捞出，然后用清水冲洗1-2遍。
（6）阳光晒：经日光照射晒干后的蔬菜，农药残留较少。
七、怎样识别用激素促进成熟的蔬菜
有的菜农为了使蔬菜生长加快、生长的多就用激素喷洒，吃了这种菜对健康不利，怎样识别呢
西红柿表皮光滑，当菜农对它喷洒催大、催肥、催熟激素后，激素药液一部分流至下端，致使该部位特别长肉，形成“尖屁股”。
这种西红柿当然不能吃。
此外，个头很大，红绿斑驳，摸起来发硬，切开后没汁或汁很少，这也是催熟剂催熟的，不宜购买。
生长怪异的如冬瓜、黄瓜、茄子之类，冬瓜、茄子上小下大，黄瓜则全身长坨，都是喷洒激素的结果。
有的水果细皮嫩肉，有的芹菜体大身长，均不要吃为好。
8.如何采购食用油,应索取哪些证件?采购食用油时，一定要采购标有“QS”标志的桶装食用油，若采购散装食用油，极易购买到潲水油及问题食用油，质量得不到保障。
应索取的证件有：销售商的卫生许可证、工商营业执照、食用油的“质量检测报告”复印件。
若不按要求对食用油进行采购和索证，一经油出了问题，找不到销售商，责任由自己全负。
八、怎样健康饮用桶装水
桶装水一旦打开，应尽量在短期内使用完，通常在一周内用完为宜，否则应加热煮开再饮用。
桶装水送上门后，即便是质量较好的桶装饮用水，放置时间太长也易滋生细菌。
尤其是在炎热的夏季，温度高，细菌繁殖速度也加快，更不能久存。
桶装矿泉水，最好放在避光、通风阴凉的地方，避免在阳光下曝晒。
同时还要警惕饮水机的二次污染，注意定期清洗饮水机。
要求厂家每隔一段时间上门负责清洗饮水机。
购买桶装水要注意先看包装桶是否晶莹透明，质感硬。
质量较好的桶（瓶）应由PC材质制成，桶体透明度高，表面光滑清亮，而使用或添加回收废旧垃圾塑料为原料制成的桶，俗称：“黑桶”，颜色发黑、发暗、透明性差。
有部分厂家为降低成本，仍在使用这种明令禁止使用的包装桶装水，消费者应仔细选择鉴别。
水桶盖应鲜亮光洁，硬度较高。
另外，消费者可尝试倒置水桶，应不漏水。
当把水桶从饮水机上拔出时，水桶的内应恰好将水桶再次堵上。
合格的饮用水应该无色、透明、清澈、无异味和异臭，没有肉眼可见物。
颜色发黄、浑浊、有絮状沉淀或杂质，有异味的水产品一定不能饮用。
九、哪些原因可导致食物中毒等食源性疾病发生
（1）冷藏方法不正确，如将煮熟的食品长时间存放于室温下冷却，把大块食物贮存于冰柜中，或冷藏温度不够。
（2）从烹调到食用的间隔时间太长，使细菌有足够的繁殖时间。
（3）烹调或加热方法不正确，加热不彻底，食物中心温度低于70℃。
（4）由病原携带者或感染者加工食品。
（5）使用受污染的生食品或原辅料。
（6）生熟食品交叉污染。
（7）在室温条件下解冻食物。
（8）厨房设备、餐具清洗、消毒方法不正确。
（9）使用了来源不安全的食物。
（10）加工制备后的食物受污染。
十、预防食源性疾病的十项建议1、不买不食腐败变质、污秽不洁及其它含有害物质的食品；2、不食用来历不明的食品；不购买无厂名厂址和保质期等标识不全的食品；3、不光顾无证无照的流动摊档和卫生条件不佳的饮食店；不随意购买、食用街头小摊贩出售的劣质食品、饮料。
这些劣质食品、饮料往往卫生质量不合格，食用会危害健康。
4、不食用在室温条件下放置超过2小时的熟食和剩余食品；5、不随便吃野菜、野果。
野菜、野果的种类很多，其中有的含有对人体有害的毒素，缺乏经验的人很难辨别清楚，只有不随便吃野菜、野果，才能避免中毒，确保安全。
6、生吃瓜果要洗净。
瓜果蔬菜在生长过程中不仅会沾染病菌、病毒、寄生虫卵，还有残留的农药、杀虫剂等，如果不清洗干净，不仅可能染上疾病，还可能造成农药中毒。
7、不饮用不洁净的水或者未煮沸的自来水；水是否干净，仅凭肉眼很难分清，清澈透明的水也可能含有病菌、病毒，喝开水最安全8、直接食用的瓜果应用洁净的水彻底清洗并尽可能去皮；不吃腐烂变质的食物，食物腐烂变质，就会味道变酸、变苦；散发出异味儿，这是因为细菌大量繁殖引起的，吃了这些食物会造成食物中毒。
9、进食前或便后应将双手洗净；养成吃东西以前洗手的习惯。
人的双手每天干这干那，接触各种各样的东西。
会沾染病菌、病毒和寄生虫卵。
吃东西以前认真用肥皂洗净双手，才能减少“病从口入”的可能。
10、在进食的过程中如发现感官性状异常，应立即停止进食。
十一、八种常见的饮食卫生误区如下：1 、好热闹喜聚餐：每当节假日，人们大多喜欢三三两两到餐馆“撮一顿”，或是亲朋好友在家聚餐，又热闹又便于交流感情。
这样做不利于健康，不符合饮食卫生，特别是当前这一非常时期，最好实行分餐制。
分餐的做法是对别人和自己生命健康的负责和尊重。
2 、用白纸包食物：有些人喜欢用白纸包食品，因为白纸看上去好像干干净净的。
可事实上，白纸在生产过程中，会加用许多漂白剂及带有腐蚀作用的化工原料，纸浆虽然经过冲洗过滤，仍含有不少化学成分，会污染食物。
至于用报纸来包食品，则更不可取，因为印刷报纸时，会用许多油墨或其他有毒物质，对人体危害极大。
3 、用酒消毒碗筷：一些人常用白酒来擦拭碗筷，以为这样可以达到消毒的目的。
殊不知，医学上用于消毒的酒精度数为 75°，而一般白酒的酒精含量多在 56°以下，并且白酒毕竟不同于医用酒精。
所以，用白酒擦拭碗筷，根本达不到消毒的目的。
4 、抹布清洗不及时：实验显示，在家里使用一周后的全新抹布，滋生的细菌数会让你大吃一惊；如果在餐馆或大排档，情况会更差。
因此，在用抹布擦饭桌之前，应当先充分清洗。
抹布每隔三四天应该用开水煮沸消毒一下，以避免因抹布使用不当而给健康带来危害。
5 、用卫生纸擦拭餐具：化验证明，许多卫生纸（尤其是非正规厂家生产的卫生纸）消毒状况并不好，这些卫生纸因消毒不彻底而含有大量细菌；即使消毒较好，卫生纸也会在摆放的过程中被污染。
因此，用普通的卫生纸擦拭碗筷或水果，不但不能将食物擦拭干净，反而会在擦拭的过程中，给食品带来更多的污染机会。
6 、用毛巾擦干餐具或水果：人们往往认为自来水是生水、不卫生，因此在用自来水冲洗过餐具或水果之后，常常再用毛巾擦干。
这样做看似卫生细心，实则反之。
须知，干毛巾上常常会存活着许多病菌。
目前，我国城市自来水大都经过严格的消毒处理，所以说用洗洁剂和自来水彻底冲洗过的食品基本上是洁净的，可以放心食用，无须再用干毛巾擦拭。
7 、将变质食物煮沸后再吃：有些家庭主妇比较节俭，有时将轻微变质的食物经高温煮过后再吃，以为这样就可以彻底消灭细菌。
医学实验证明，细菌在进入人体之前分泌的毒素，是非常耐高温的，不易被破坏分解。
因此，这种用加热方法处理剩余食物的方法是不可取的。
8 、把水果烂掉的部分剜掉再吃：有些人吃水果时，习惯把水果烂掉的部分削了再吃，以为这样就比较卫生了。
然而，微生物学专家认为：即使把水果上面已烂掉的部分削去，剩余的部分也已通过果汁传入了细菌的代谢物，甚至还有微生物开始繁殖，其中的霉菌可导致人体细胞突变而致癌。
因此，水果只要是已经烂了一部分，就不宜吃，还是扔掉为好。
宣传标语1、国以民为本，民以食为天，食以安为先2、群众利益无小事，食品安全是大事3、实施食品放心工程，促进经济社会协调发展4、关注食品安全，关爱健康人生5、建立诚信体系，保障食品安全6、加强农村食品监管，建设社会主义新农村7、提高食品安全意识，创造幸福美好生活8、以人为本，确保饮食安全9、从源头抓质量，确保食品安全10、食品安全，人人有责
食品上的NSX、HSD是什么意思
最佳答案 检测原理： 大肠是能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无杆菌，该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
食品中的大肠菌群数系以100ml(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
2.仪器设备与器具： 2.1 恒温培养箱：36±1℃。
2.2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
2.3 接种针。
2.4 显微镜。
2.5 超净工作台。
2.6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
2.7 天平：感量0.01g。
2.8 灭菌釜。
2.9 培养皿（直径为90mm）、试管，经121℃、30分钟灭菌。
2.10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片 3.培养基及试剂： 3.1 乳糖胆盐发酵管：按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.2 伊红美兰琼脂平板： 按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.3 乳糖发酵管： 按照制造厂家使用说明进行配制，灭菌。
3.4 革兰氏染色液。
3.4.1 结晶紫染色液： 结晶紫 1g 95%乙醇 20ml 1%草酸铵水溶液 80ml 将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。
3.4.2 革兰氏碘液： 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300 ml。
3.4.3 沙黄复染液： 沙黄 0.25g 95%乙醇 10ml 蒸馏水 90ml 将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。
3.5 生理盐水。
4.检验程序： 检样 ↓ 稀释 ↓ 乳糖胆盐发酵管，36±1℃，24±2hr ↓ ↓ 不 产气 ↓ ↓ 大肠菌群阴性 伊红美兰琼脂平板，36±1℃，24±2hr ↓ 报告 ↓ ↓ 革兰氏染色 乳糖发酵管，36±1℃，24±2hr ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ G+ G-，无芽孢杆菌 产气 不产气 ↓ ↓ 大肠菌群阴性 大肠菌群阴性 ↓ ↓ ↓ 报告 大肠菌群阳性 报告 5.测定方法： 5.1 检样稀释： 5.1.1 以无菌操作将检样25ml(或25g)放于含有225ml灭菌生理盐水的灭菌塑料烧杯中，经充分振摇成1：10均匀稀释液。
5.1.2 用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水的 试管中，振摇成1：100稀释液。
5.1.3 重复5.1.2的操作，使成1：1000稀释液。
5.2乳糖胆盐发酵试验：根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择二个稀释度，每一稀释度接种3管，接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管。
1ml及1ml以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。
然后置于36±1 ℃培养箱内，培养24±2hr，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性；如有产气者，则可按以下程序进行。
5.3分离培养：将产气的发酵管分别接种于伊红美兰琼脂平板上，置36±1℃温箱内，培养24hr后取出，观察菌落形态，并作革兰氏染色。
5.4证实试验：在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1～2个进行革兰氏染色同时接种乳糖发酵管，置于36±1℃温箱内培养24±2hr，观察产气情况。
乳糖发酵管产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。
5.5报告：根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100ml(g)大肠菌群的最可能数。
食品中金黄葡萄球菌的检测方法是一种引起人类和动物化脓感染的重要致病菌，也是造成人类食物中毒的常见致病菌之一。
本菌广泛分布于自然界，如空气、土壤、水及其它环境中。
在人类和动物的皮肤及外界相通的腔道中，也经常有本菌存在。
据报导，在正常人群中的带菌率可达30%~80%，其中皮肤带菌率为8~22%，鼻腔和咽喉部等上呼吸道的带菌率在40~50%以上，因此其可通过各种途径和方式，尤其是经工作人员的手和上呼吸道而污染食品。
由于致病金黄葡萄球菌能产生肠毒素，故一旦细菌污染食品，并在合适的温度环境下，细菌可以大量繁殖并产生肠毒素，从而引起消费者食物中毒。
由引起的食物中毒，在世界各国都极为普遍。
特别是在北美及欧洲等地区发病率更高。
在上述这些国家中，每年有引起的食物中毒病例，仅次于沙门氏菌，而在细菌性食物中毒病例排到第2~3位，有此而造成的经济损失也相当惨重，在我国由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒病例也时有报导，所以目前世界各国都把金黄色葡萄球菌列为食品卫生的法定检测项目。
我国对金黄色葡萄球菌目前采用的方法是以国家标准GB.4789-10-84及检验检疫系统行业标准SN.0172-92作为依据。
整个检测过程获得最终结果须时5天左右，既费时又费力，并造成货物积压，也影响货物的及时出运，并使货主的仓储成本提高，造成较大的经济损失。
多年来很多食品微生物实验室都在探索和寻找一些准确性高，并快速的检测方法，最近我们分别从美国3M公司和法国生物梅里埃公司获得两种快速检测致病性金黄色葡萄球菌的培养基，其名称为： ① Petrifilm RSA. Count Plate（由美国3M公司研制生产），是一种薄膜型快速检测金黄色葡萄球菌的计数平板。
② Baird-parker + RPF Agar.（由法国生物梅里埃公司研制生产的用Baird-Parker琼脂加免血浆纤维蛋白原的金黄色葡萄球菌检测计数平板）。
原理：Petrifilm. RSA. 测试薄膜是由二部分组成。
第一部分是由黄金色葡萄球菌培养基片，此培养基中含有经修正的Barid-Parker，营养成分加上以冷水可溶解的胶质。
第二部分是一种耐热核酸酶（TNase）反应片，含有DNA及甲苯胺兰 ( Toluidine Blue - O )及四唑指示剂 (Tetraeolium)。
此指示剂有助于菌落的计数及确定葡萄球菌耐热核酸酶的存在。
耐热去氧核糖核酸（deoxyribonulcas Dnase）为产毒金葡菌之典型特征，此酶非常耐热，在100℃加热30min，不易丧失活性，在130℃之下，其D值为16.6min，此酶之分子量为16800，等电点PH为9.6,耐热去氧核糖酸与检测血浆凝固酶相似，是一种鉴定金黄色葡萄球菌的方法，在Petrifilm. RSA 检测片上，耐热DNA酶反应看起来，呈粉红色环带包围着一个红色或兰色的菌落。
Petrifilm.RSA检测片，必须与Peyrifilm耐热核酸酶反应片一起使用，单独使用将不会显示菌落，因为具有辅助计数菌落的指示剂是在反应片上，而不是在Petrifilm.RSA检测片上。
Baird-parker + RPF agar，这一培养基中含有丰富的营养成分，其中以氯化锂代替亚碲酸钾，使菌落颜色呈黑色，RPF补充有兔血浆和牛纤维蛋白原，以便检测凝固酶活力，胰酶可以抑制全部或部分围绕凝固酶阳性菌落周围沉淀晕环纤维蛋白的溶解，因此凡存在血浆凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌，将在培养基中呈现有晕环的黑色菌落，即可确认，并作计数。
实验实施材料和方法：本次实验采用以下3种试剂： 1. 美国3M公司提供的Petrifilm. Rapid. S. aureus Count Plate. 2. 法国生物~梅里埃公司提供的Baird-Parker + RPF agar . 3. 实验室自配Baird-Park琼脂（英国Oxoid）及新鲜兔血浆。
菌种来自美国菌种保存中心（America TyP Culture Collection）。
金黄色葡萄球菌共10株菌株，其菌号分别为： ATCC 27661 ATCC 27664 ATCC 13565 ATCC 51704 ATCC(K) 12600 ATCC(R) 65389 ATCC 25923 ATCC 29213 ATCC 8095 ATCC 12598 非金黄色葡萄球菌菌种5株，其菌号分别为： ATCC 51813 （大肠杆菌）、ATCC 624 （无乳链球菌）、ATCC 51816 （阴沟肠杆菌）、ATCC 6051 （枯草杆菌）、ATCC 49214 （肠炎沙门氏菌）、自然食品检样，任意购自市场。
本次实验是以同一测试样品经均质并通过无菌生理盐水作10倍递增稀释后取1至2个稀释度同时接种上述三种培养基作平行实验，在取得最终结果后相互进行比对。
上述三种培养基的接种方法是按生产商所提供的使用说明进行操作，另外Baird-Parker Agar 培养基是按SN0172-92标准进行操作。
A、 本次实验共测试已知标准菌种共15株，其中葡萄球菌10株，其他菌种5株（包括大肠杆菌、阴沟肠杆菌、肠炎沙门氏菌、枯草杆菌和无乳链球菌）。
B、 测试自然食品检样共101只（其中包括肉11只、肉类14只、水产品17只、牛奶25只、蔬菜22只、豆制品12只）。
结果： A、 被检菌种10株，金黄色葡萄球菌在三种培养基上都能检出生长情况良好，同一稀释度的菌液，除个别菌株外在3种培养基计数检测结果基本都在一个数量级上，无显著差异。
而5株非金黄色葡萄球菌的菌株在三种培养基上全部不能生长。
B、 自然食品检样共接种101只，每一检样同一稀释浓度分别同时种三种培养基，最终共检出金黄色葡萄球菌45只，占全部检样的44.5％，其中Petrifilm RSA 检出阳性结果为42只，占全部阳性检样的93.3％，Baird-Parker＋RPF Agar. 检出阳性结果26只，占全部阳性检样的57.7％。
Baird-Parker. Agar 检出阳性结果32只，占全部阳性检样的71.1％。
讨论 1. 用15株标准菌在3种培养基中的检测，10株金黄色葡萄球菌以同一浓度接种，结果生长良好，其最终计数基本一致，定位在同一数量级，5株非金黄色葡萄球菌接种上述三种培养基全部不长，说明上述三种培养基对金黄色葡萄球菌选择良好。
2. 以101只自然样品同一均质稀释液，同时接种三种培养基，从最终结果来看，对金黄色葡萄球菌的阳性检出率为44.5％ 3. 从检测程序来年，Petrifilm. RSA及Baird-Parker＋RPF. Agar. 都在样品接种后28~30h观察结果，并不必再做证实试验，而如以Baird-Parker Agar检测，须在接种后48h观察平板，并挑取可疑菌落转种到营养肉汤中，在经18-24h后做血浆凝固酶或耐热DNA酶试验进行证实，最终计数，前后约须80h。
4. 从本次试验中观察，使用上述三种培养基对食品中金黄色葡萄球菌含量的直接计数检测，其样品接种液的含量拟控制在100个\\\/ml以内，比较容易分清并计数，如菌量过浓，则将会影响最后的读数，因此对新送的被检样品，如在不了解污染的情况下一般必须要做2个以上的稀释度，同时分别接种，才能获得较为满意的结果。
而在Baird-Parker＋RPF Agar及Baird-Parker. Agar接种时必须将1ml样液作三只平板涂布（0.3、0.3、0.4ml）这样就会造成手续繁琐试剂消耗较大，但Baird-Parker. RPF. 培养基也可以1ml样液作倾注培养，并作计数。
5. 在整个测试过程中，我们发现，按使用说明对Petrifilm. RSA. 及Barid-Parker＋RPF. Agar，操作规定在接种24h后观察结果，此时往往由于菌落长得经较小，特征瓜不明显，但如果继续放置一夜以后金葡萄菌落特征明显，并可能会经第一天观察数量有所增加，这样可以提高检测结果的可信度。
6. 由于对上述两种培养基的试用期间我们尚未获得供应商的报价，故无法测算每一样品的测试成本价格。
但可以予计上述两面种快速检测培养基的耗材费用要高于常规经典方法（Baird-Parker Agar）的费用。
7. 通过本次实验，我们感到使用美国3M公司生产的Petrifilm. RSA Plate培养基和法国生物－梅利埃公司生产的Baird-Parker RPF. Agar培养基检测中的金黄色葡萄球菌。
可以比目前常规检测方法时间可缩短一半。
并可以明显节省大量人力。
这完全符合实验室快速检测的要求，尤其是对基层较简陋的实验室条件中，更显其使用方便的优越性。
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