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小鼠胚胎移植心得体会

时间:2014-12-21 00:33

为什么我的小鼠胚胎移植效率这么低

主要问题如下:1.从小鼠输卵管中取出单细胞胚胎后,发现胚胎在体外培养时急剧变形[变的不圆滑,原核不清],即使不进行原核注射,大部分胚胎也很难进入二细胞期.在以前是没有这种情况的,这真烦人,因为得不到足够的胚胎注射,而且注射后也很难存活.2.注射的问题可能相对较小,注射后的胚胎死亡率应该没有超过30%.3.胚胎移植可能存在一些潜在的问题,虽然大多时候都能顺利将胚胎移植进去,但是其出生率却低的吓人,只有3分之1的移植小鼠可能生出小鼠,而且生出的小鼠很多时候还只有一只,呜呼,愁莫过于此啊!花那么多的时候做出的小鼠没有生出后代.郁闷啊,这固然与注射后的胚胎的质量有很大关系,但移植是也可能有问题,因为有时候感觉质量还不错的胚胎也没有生出.4.小鼠饲养环境不是很好,小鼠养的太久就会在脑袋上长出很恶心的东西,就像癞子,红色的,很恶心.我只有给他们注射青霉素,链霉素,似乎有一定的效果.

小鼠、家兔什么时期进行胚胎移植

桑椹胚期或囊胚期。

胚胎移植在什么时间最好

(高中生物)

不同胚胎移植时间不同,例如牛和羊要培养到桑阶段和囊胚阶段才进行移植,和家兔等实验动物可在更早的阶段移植,人的体外受精胚胎,即试管胚胎,可在8-16个细胞阶段移植。

P.S.这段话在生物选修3的72页小字部分,刚找到的,可以详细看一下~

用小鼠做造血干细胞移植实验时照射是为什么

小鼠皮下或相关器脏可以给细胞提供存活的条件,也在一些情况下为干细胞分化和分化后的成熟提供条件.同时为了使移植的细胞可以存活,免于免疫排斥,因此采用的小鼠一般都为免疫缺陷小鼠,也就是不会产生免疫反应.

小鼠、家兔在胚胎发育的什么时期进行移植

早期胚胎,一般是在桑椹胚至囊胚时期。

cre 转基因小鼠 cre是什么意思

1材料和方法1.1材料ICR和C57BL\\\/6小鼠.所有实验用小鼠均在SPF动物房饲养,温度控制在℃,光控,自由采食.Co60灭菌饲料;孕马血清,46~48h后给供体鼠注射hCG,hCG注射当日下午和雄鼠合笼,次日6:30~8:00检查雌鼠有无阴栓以判定是否已经交配.1.2.1.2受体鼠的预备实验开始前提前预备输精管结扎雄鼠,挑选至少两次和雌鼠交配后都不能使其受孕的结扎雄鼠备用.实验第3日下午合笼受体鼠和结扎雄鼠,次日06:30~08:00检查雌鼠有无阴栓以判定是否已经交配,交配成功的雌鼠作为胚胎移植的受体鼠.1.2.1.3受精卵的收集处死供体鼠,打开腹腔,取出输卵管.将输卵管置于M2培养液中,用小镊子撕开输卵管膨大部,可见有卵团溢出,用吸管〔5-6〕将卵团转移至含有透明质酸酶的M2培养液滴中,吹吸数次,洗掉卵细胞四周的泡沫细胞.将受精卵转移至含有M16培养液滴的培养皿中,37℃,50mL\\\/LCO2培养箱内短暂培养.1.2.2胚胎移植方法将106只受体雌鼠随机分为两组,其中一组采用传统的胚胎移植方法〔4〕;另一组采用改进的胚胎移植方法.1.2.2.1传统的胚胎移植方法〔4〕用水合氯醛麻醉受体鼠,沿受体鼠背部中线最后一根肋骨水平切1cm左右切口,轻轻拨开切口,可见位于卵巢上方的白色脂肪垫.用小镊子夹住白色脂肪垫将其拉到体外,用小血管夹夹住,并靠其重力起固定作用,以防输卵管缩回体腔.用移卵管吸15~20个受精卵预备移植.将小鼠转到解剖镜下仔细寻找到输卵管.可见输卵管被一层呈半透明的囊膜所包绕,将囊膜撕破而暴露输卵管,将移卵管内受精卵移植到输卵管膨大部.1.2.2.2改进的胚胎移植方法麻醉及手术区域暴露同上,但在胚胎移植囊膜处理时不同.先用吸卵管在囊膜无或少血管分布处穿一小洞,再将吸卵管通过囊膜上的小洞轻轻送进输卵管口,将移卵管内受精卵移植到输卵管膨大部.2结果2.1胚胎移植术改进前后ICR小鼠胚胎移植成功率比较ICR小鼠在改进胚胎移植术式后比传统的胚胎移植技术在成功率上有较大的提高,统计学比较有显著差异7380-7384.

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